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膜再生液

使用膜再生液可以对同一张膜进行多次 Western Blot 检测。在室温条件下,将用过的膜浸泡在膜再生液 10-60 分钟,可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后,可以使用不同的抗体进行下一轮 Western Blot 实验。适宜从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏,采用这一策略多次检测同一 张膜上的蛋白,能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差, 使可比性更强。
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膜再生液

品牌:Solarbio | 货号:SW3020


产品简介:

使用膜再生液可以对同一张膜进行多次 Western Blot 检测。在室温条件下,将用过的膜浸泡在膜再生液 10-60 分钟,可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后,可以使用不同的抗体进行下一轮 Western Blot 实验。适宜从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏,采用这一策略多次检测同一 张膜上的蛋白,能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差, 使可比性更强。 Western Blot


膜再生液特点是:

无毒无味无害,室温下使用,室温下保存;可对同一张膜进行 5 次以上的 Western Blot 检测。

适用:清除硝酸纤维素膜或 PVDF 膜上结合的抗体,不影响抗原蛋白。


使用方法:

1. 将膜充分浸泡于适当体积的再生液中,室温洗脱10-20分钟,时间长短应该参考注意事项进行优化,洗脱某些抗体需较长时间,更有长达60分钟之久,如果室温洗脱效果不好,可将膜再生液加热至50度,在50度水浴条件下进行洗脱。

2. 取出膜,用洗涤液(如 TBST 等)漂洗两次。

3. 此时膜上抗体已除去,可重新封闭后再加入另一种抗体进行检测。


注意事项: 

1. 膜再生液实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下将抗体洗脱下来,实际操作中,膜类型、抗体类型、 浓度及抗原特性都影响洗脱难易度。

2. 适用于 ECL 和类似的化学发光试剂进行的 Western 检测。不适用于非化学发光试剂进行的 Western 检测,例如 DAB,NBT/BCIP。

3. 用 ECL 显色后,再生液洗脱几分钟后,可再次加入 ECL 显色液显影,如胶片上显示条带,表明抗体 未除净,须进一步在再生液中浸泡,至胶片上无显色。

4. 使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用 BSA 封闭的膜更容易再生。

5. 尽量避免让膜干燥。


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